本发明提供一种抗CD19抗体和MUC1抗原肽的偶联物及其应用，所述偶联物包括抗CD19抗体重链，以及偶联有MUC1抗原肽的抗CD19抗体轻链即抗CD19抗体轻链‑MUC1；所述抗CD19抗体重链的氨基酸序列为SEQ ID NO:1所示的序列；所述抗CD19抗体轻链‑MUC1的氨基酸序列为SEQ ID NO:2所示的序列。所述偶联物与靶向MUC1的T淋巴细胞联合给药，可以获得同时靶向MUC1和CD19的治疗效果，对MUC1和CD19双抗原同时表达的肿瘤细胞具有较强的杀伤作用。
本发明提供了靶向CD19的嵌合抗原受体T细胞、制备方法及应用，涉及免疫细胞领域，能够提高CAR‑T细胞治疗中T细胞活化能力，克服转染效率不足的问题，对CD19的杀伤能力强。该靶向CD19的嵌合抗原受体T细胞，表面表达靶向CD19的嵌合抗原受体基因，所述靶向CD19的嵌合抗原受体基因由CD19的单链抗体CD19ScFv、CD8的铰链区和跨膜区、CD28的胞内信号结构、4‑1BB的胞内信号结构以及CD3ζ的胞内信号结构域串联构成，其碱基序列如SEQ ID NO2所示。
本发明提供了一种靶向CD19的单链抗体，所述靶向CD19的单链抗体包括如SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列，所述靶向CD19的单链抗体为人源化单链抗体。本发明还提供了一种包括所述靶向CD19的单链抗体的嵌合抗原受体T细胞，所述靶向CD19的嵌合抗原受体可以专一性地靶向肿瘤细胞上的CD19，促进T细胞在患者体内的扩增，高效且特异性的杀伤肿瘤细胞。此外，人源化单链抗体制得的靶向CD19的嵌合抗原受体T细胞具有更好的维持细胞的活力和杀伤力。本发明还提供了一种靶向CD19的嵌合抗原受体T细胞的制备方法和应用。
本发明公开了编码同时靶向CD19和CD20的嵌合抗原受体的核酸分子，所述嵌合抗原受体包含胞外区、跨膜区和胞内信号转导区，其编码的所述胞外区包含CD19和CD20结合结构域，其中，所述CD19和CD20结合结构域中的CD20结合结构域为如SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列。通过实验证明该嵌合抗原受体修饰的T细胞对CD19+、CD20+和CD19+/CD20+B细胞淋巴瘤细胞和B细胞淋巴细胞白血病细胞有很强的杀伤作用，对不表达CD19和CD20的细胞几乎无杀伤作用，有效防止了脱靶效应。本发明嵌合抗原受体可用于CD19+B细胞和CD20+B细胞血液肿瘤的治疗，以及与CD19 CAR‑T细胞或CD20 CAR‑T
